JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 3:48 min. • July 8th, 2025
Prendi un cucciolo di ippocampo di topo raccolto in un tampone.
Taglia l'ippocampo in frammenti più piccoli e trasferiscili in un tubo conico.
Lavare il fazzoletto con tampone. Una volta che i frammenti si sono depositati, rimuovere il tampone. Ora, aggiungi il tampone fresco e la tripsina.
Durante l'incubazione, la tripsina, un enzima proteolitico, digerisce la matrice extracellulare del tessuto, allentando i neuroni dell'ippocampo.
Lavare il fazzoletto digerito con un tampone.
Una volta che i frammenti si sono depositati, rimuovere il tampone. Aggiungere un tampone fresco e pipettare ripetutamente il tessuto per dissociarlo meccanicamente, ottenendo una sospensione unicellulare.
Una volta che il tessuto non digerito si è depositato, trasferire la sospensione cellulare su vetrini coprioggetti rivestiti di poli-L-lisina con supporti in cera all'interno di una piastra di coltura contenente terreni.
Le cellule si attaccano alle superfici rivestite di poli-L-lisina attraverso interazioni elettrostatiche.
Ora, posiziona i vetrini coprioggetti aderenti ai neuroni rivolti verso il basso in un piatto contenente cellule corticali gliali o non neuronali in terreni privi di siero.
In coltura
Visualizza la trascrizione completa e accedi a migliaia di video scientifici