Costruzione di reti neuronali tridimensionali accoppiate a array di microelettrodi

Prendi una sospensione di neuroni ippocampali embrionali di ratto.

Trasferisci i neuroni sull'area attiva rivestita di fattore di adesione di un array di microelettrodi, o MEA. Questa area attiva è delimitata da una struttura polimerica.

Incubare il MEA. I neuroni aderiscono all'area attiva MEA rivestita, formando una rete neuronale 2D.

Inoltre, trasferire i neuroni su un monostrato di microsfere di vetro rivestito con fattore di adesione in inserti di membrana all'interno di una piastra a più pozzetti.

Incubare per far sì che i neuroni si attacchino alle perle rivestite di fattore di adesione.

Trasferire le microsfere con i neuroni aderenti nell'area MEA confinata contenente la rete neuronale.

Le microsfere si autoassemblano per formare una struttura esagonale.

Ripetere più volte il trasferimento di microsfere sul MEA, costruendo strati che si autoassemblano, formando una struttura 3D compatta.

Aggiungere il terreno all'area attiva confinata MEA e incubare.

I neuroni crescono, formando una rete neuronale 3D interconnessa.

Piastra le cellule a una densità di 2.000 cellule per millimetro quadrato sull'area attiva del MEA, definita dal vincolo PDMS per creare una rete neuronale 2D. Q