JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 4:51 min. • July 8th, 2025
Tagliare la corteccia di un topo in piccoli pezzi e trasferirla in un mezzo di dissezione freddo contenente una soluzione salina tamponata.
Aggiungere enzimi digestivi per dissociare la matrice extracellulare.
Per rimuovere gli enzimi residui, lavare con il mezzo di dissezione freddo.
Sostituisci questo terreno con un mezzo di arricchimento degli astrociti.
Quindi, utilizzare una pipetta per dissociare i pezzi di tessuto.
Passare la sospensione attraverso un colino per rimuovere il tessuto indissociato e ottenere singole cellule.
Trasferire le celle su una piastra rivestita di polimero caricata positivamente. Incubare agitandosi.
Gli astrociti aderiscono saldamente, mentre i neuroni debolmente legati, la microglia e gli oligodendrociti si staccano.
Il mezzo di arricchimento converte gli astrociti maturi in astrociti poligonali in divisione.
Rimuovere le cellule staccate e lavare gli astrociti con un tampone fosfato.
Aggiungi enzimi digestivi per staccare gli astrociti.
Aggiungere un terreno contenente siero per fermare l'attività enzimatica. Raccogliere gli astrociti in una provetta e centrifugare.
Scartare il surnatante. Risospendere le cellule in un mezzo di maturazione degli ast
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