JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 4:33 min. • July 8th, 2025
Prendiamo le cellule staminali pluripotenti indotte dall'uomo trasdotte o hiPSC, che sovraesprimono la neurogenina-2, guidate dal sistema antibiotico inducibile dalla doxiciclina.
Trasferirli nelle aree degli elettrodi attivi rivestiti di proteine di adesione nei pozzetti di un array di microelettrodi multipozzetto.
Consentire alle hiPSC di attaccarsi alle aree degli elettrodi attivi rivestiti.
Aggiungere terreni integrati con doxiciclina, che induce la sovraespressione della neurogenina-2, un fattore di trascrizione neurale-specifico.
La neurogenina-2 innesca percorsi molecolari e porta alla differenziazione di hiPSC in cellule precursori neurali, mentre i costituenti dei terreni aiutano la sopravvivenza cellulare.
Introdurre gli astrociti nei pozzetti dell'array di microelettrodi, dove aderiscono all'area attiva dell'elettrodo.
Sostituire i terreni con terreni neurobasali contenenti fattori di crescita neurogeni, doxiciclina e un inibitore della crescita cellulare.
L'inibitore previene la proliferazione degli astrociti ed elimina le hiPSC indifferenziate.
Nel corso del tempo, l'espressione sostenuta della neurogenina-2 e i fattori di crescita guidano la differenziazione delle cel
Visualizza la trascrizione completa e accedi a migliaia di video scientifici