JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 4:06 min. • July 8th, 2025
Inizia con le cellule nervose coltivate in un mezzo di differenziazione cellulare.
Aggiungi nanobarre d'oro nel mezzo.
Incubare per consentire alla cellula di inghiottire il nanorod attraverso un processo chiamato endocitosi.
Stimola le nanobarre con un laser.
Il raggio laser eccita gli elettroni di superficie sulla nanorod. Gli elettroni eccitati ritornano quindi allo stato fondamentale, rilasciando energia termica.
Questo calore stimola le cellule nervose a produrre proiezioni supportate da una specifica proteina del citoscheletro chiamata βIII-tubulina.
Rimuovere il mezzo esaurito.
Correggi le celle. Aggiungere un detergente adatto per permeabilizzare la membrana.
Aggiungere un agente bloccante per prevenire il legame non specifico degli anticorpi.
Etichettare le cellule con anticorpi primari che hanno come bersaglio la βIII-tubulina.
Aggiungere anticorpi secondari marcati in fluorescenza che interagiscono con gli anticorpi primari.
Colorare il nucleo con un colorante fluorescente blu.
Utilizzando la microscopia a epifluorescenza, osservare le cellule di colore rosso con nuclei blu.
Le proiezioni allungate della cellula indicano la differenziazione delle cellule nervose.
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