Generazione di cellule neuronali da cellule staminali pluripotenti derivate dal sangue

Prelevare una micropiastra con vetrini coprioggetti posta sul fondo dei pozzetti.

Introdurre un polimero caricato positivamente per rivestire i vetrini coprioggetti e lavare per rimuovere l'eventuale polimero non legato. Trattare con una proteina della matrice extracellulare per rivestire i vetrini coprioggetti e aspirare le proteine non legate.

Il rivestimento funge da substrato di coltura che facilita l'adesione cellulare.

Aggiungere un mezzo di induzione ai pozzetti e introdurre una sospensione di cellule staminali pluripotenti derivate dal sangue, o BD-PSC. Queste cellule, in grado di differenziarsi in vari tipi di cellule, vengono generate attraverso la riprogrammazione delle cellule progenitrici del sangue.

Incubare per far aderire le cellule al substrato. I fattori di crescita e i nutrienti nel mezzo di induzione trasformano le BD-PSC in cellule progenitrici neurali.

Introdurre un mezzo di differenziazione contenente fattori di crescita neuronali e incubare, innescando la differenziazione dei progenitori neurali in un fenotipo neuronale, che mostra processi cellulari estesi e contatti cellula-cellula.

Posizionare i vetrini coprioggetti in piastre a 4 pozzetti e ricoprirli co