Differenziazione delle cellule staminali embrionali umane in progenitori neurali

Inizia con una piastra multipozzetto rivestita con una matrice di membrana basale che include polimeri extracellulari e proteine di adesione.

Seminare i pozzetti con una sospensione unicellulare di cellule staminali embrionali umane in un terreno di crescita contenente un inibitore della Rho-chinasi.

Incubare per consentire l'adesione delle cellule staminali alla matrice.

Le cellule assorbono l'inibitore, che blocca gli enzimi Rho-chinasi e previene la morte cellulare apoptotica.

Questo favorisce la sopravvivenza delle cellule e le mantiene in uno stato indifferenziato.

Sostituisci il terreno di coltura con un mezzo di induzione neurale ricco di fattori di crescita e contenente inibitori che hanno come bersaglio specifici recettori ALK.

Questi inibitori interagiscono con i loro recettori e bloccano le vie di segnalazione BMP e TGF-β, impedendo la differenziazione cellulare in precursori endodermici o mesodermici.

Ciò porta alla differenziazione selettiva delle cellule staminali in precursori ectodermici.

Questi precursori ectodermici utilizzano i nutrienti e i fattori di crescita del terreno per moltiplicarsi e successivamente differenziarsi in cellule progenitrici neurali.

Piastra