Preparazione di colture a fette fluttuanti da un cervello umano adulto

Prendete un tessuto cerebrale umano immerso in una soluzione di affettatura. Il pH biologico e i nutrienti della soluzione aiutano a mantenere la funzionalità dei tessuti.

Rimuovere lo strato più esterno delle meningi e tagliare il tessuto per creare una superficie piana.

Eliminare la soluzione in eccesso dal tessuto. Fissare il tessuto tagliato a un disco campione con un blocco di agarosio, mantenendo il tessuto a contatto con il blocco per facilitare il sezionamento.

Metti il disco in una vaschetta tampone per vibratomo e copri il fazzoletto con una soluzione per affettare ghiacciata.

Utilizzando il vibratomo, generare fette uniformi che preservano l'architettura del tessuto.

Taglia il tessuto in eccesso, assicurandoti una proporzione costante di materia grigia e bianca.

Mettere le fette in una piastra a pozzetti multipli contenente un terreno di coltura e incubare.

Le fette rimangono sospese nel terreno per garantire un accesso uniforme ai nutrienti, una tecnica nota come coltura a fette libere.

Rifornire regolarmente la coltura con un terreno integrato con fattore di crescita neurale per mantenere la vitalità dei tessuti.

Trasferire il campione in una capsula di Petri contenent