Preparazione di sezioni cerebrali utilizzando un metodo di recupero protettivo basato su NMDG

0 visualizzazioni • 3:59 min. • July 8th, 2025

Inizia con un cervello isolato. Immergere rapidamente il cervello in un liquido cerebrospinale artificiale pre-raffreddato o aCSF per mettere in pausa i processi metabolici.

L'aCSF contiene NMDG, un grande catione organico che riduce il danno e la morte delle cellule neuronali.

L'aCSF contiene anche HEPES, che mantiene il pH e la concentrazione di sale e previene il gonfiore e il danneggiamento cellulare.

Trasferisci il cervello su una capsula di Petri contenente una carta da filtro.

Taglia il cervello per ottenere la regione desiderata.

Fissare il blocco cerebrale nel portacampioni utilizzando una colla adatta e incorporarlo nell'agarosio.

Posizionare il portacampioni nell'affettatrice.

Riempire il serbatoio dell'affettatrice con l'aCSF pre-raffreddato e aerare la soluzione per garantire un apporto ottimale di ossigeno.

Ottieni sezioni del blocco cerebrale.

Trasferire le sezioni nell'aCSF preriscaldato per riavviare i processi metabolici, consentendo alle sezioni di riprendersi.

Estrarre delicatamente il cervello intatto nel becher di NMDG-HEPES aCSF preraffreddato e lasciare che il cervello si raffreddi uniformemente per circa 1 minuto. A questo punto, con una spatola grande, tra

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