Una tecnica per l'incubazione prolungata del tessuto neuronale della retina

Prendi un occhio di topo intatto nel liquido cerebrospinale artificiale, o aCSF, e incidi per isolare l'oculare contenente la retina.

Trattare con una soluzione enzimatica per rimuovere la membrana limitante interna, esponendo le cellule neuronali.

Immergere il tessuto in una soluzione inibitoria per fermare la digestione e lavare per rimuovere la soluzione in eccesso.

Porre il tessuto in un incubatore specializzato a bassa temperatura per rallentare il metabolismo cellulare, preservando il tessuto.

Questo incubatore è composto da una camera principale con una rete per il montaggio dei tessuti. La camera è riempita con aCSF e la sua temperatura e il suo pH sono controllati per preservare la funzionalità dei tessuti.

Per eliminare la contaminazione microbica, l'aCSF viene pompato in un'altra camera e trattato con radiazioni ultraviolette per uccidere eventuali microbi.

L'aCSF sterilizzato viene quindi pompato nuovamente nella camera principale.

Per isolare la retina, rimuovere l'oculare, separare la retina dal tessuto circostante e rimetterla nell'incubatrice.

Per la preparazione dell'intera montatura retinica, enucleare immediatamente gli occhi da un animale soppresso. Fai un picco