Stabilire una co-coltura di cellule della polpa dentale e neuroni del trigemino per la comunicazione incrociata

Inizia con una sospensione ricca di cellule staminali mesenchimali ottenuta dal tessuto della polpa dentale del topo.

Incubare per consentire l'adesione e la proliferazione cellulare, formando un monostrato.

Posizionare un inserto di membrana porosa rivestito di laminina nel pozzetto contenente le cellule della polpa dentale.

Seminare l'inserto con un terreno di co-coltura contenente neuroni trigeminali derivati dal cervello del topo. Incubare per consentire l'attaccamento dei neuroni.

Sostituire il terreno con un terreno di co-coltura contenente regolatori della crescita come uridina e 5-fluoro-2 desossiuridina.

Queste molecole entrano nelle cellule e controllano la crescita delle cellule staminali mesenchimali che proliferano attivamente inibendo la sintesi del DNA.

Nel tempo, le cellule mesenchimali secernono piccole molecole di segnalazione che passano attraverso la membrana porosa per stimolare i neuroni del trigemino.

Questa stimolazione provoca l'allungamento dei processi neuronali dei neuroni trigeminali verso le cellule mesenchimali. Inoltre, i neuroni secernono molecole di segnalazione, consentendo la comunicazione incrociata.

Dopo l'eutanasia del topo, posizionare la tes