Stabilire un tumore cerebrale in un modello di co-coltura a fette organotipiche

Inizia con una fetta di cervello di topo incorporata nell'agarosio.

Posizionare la fetta di cervello su un inserto di membrana contenente un terreno di coltura.

Immergere la fetta per garantire un'esposizione uniforme ai nutrienti.

Raccogliere un piccolo volume di terreno dall'inserto e trasferirlo sul fondo del pozzetto.

Rimuovere il fluido in eccesso dall'inserto.

Trasferire l'inserto in una capsula di Petri contenente il terreno di coltura.

Rimuovere con cura i bordi dell'agarosio dalla fetta per renderla accessibile per le successive interazioni.

Posizionare l'inserto in un nuovo pozzetto contenente il terreno di coltura e incubarlo per facilitare il recupero della fetta.

Aggiungere cellule tumorali cerebrali umane alla fetta e incubare.

Le cellule tumorali interagiscono con le cellule cerebrali e il microambiente all'interno della fetta, avviando la moltiplicazione e stabilendo un modello di co-coltura 3D.

Usando una schiumarola, posiziona una fetta di cervello nel supporto sull'inserto e premi delicatamente la fetta in modo che sia completamente sommersa. Ripetete il procedimento per tutte le fette. Quindi, estrarre un millilitro di terreno di coltura a fette dalla parte supe