JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:26 min. • July 8th, 2025
Prendi una piastra multipozzetto rivestita con un tensioattivo per ridurre la tensione superficiale del pozzetto.
Aggiungere il rapporto desiderato di astrociti e neuroni in un terreno di coltura adatto.
Centrifugare per depositare le cellule e poi incubare.
La bassa tensione superficiale impedisce alle cellule di attaccarsi alla superficie del pozzetto, causandone l'aggregazione.
Le cellule aderiscono l'una all'altra attraverso varie interazioni di membrana, comprese le molecole di adesione, formando una sfera di cocoltura 3D.
Raccogli le sfere e trasferiscile in un tubo.
Lascia che le sfere si depositino. Rimuovere il surnatante e aggiungere un terreno di coltura fresco.
Trasferire le sfere in un pallone da centrifuga contenente un mezzo di coltura adatto e incubare con centrifuga costante.
Nella sfera, i neuroni estendono le proiezioni l'uno verso l'altro, formando una giunzione chiamata sinapsi, mentre l'astrocita si estende verso la sinapsi, stabilendo una stretta associazione con i neuroni.
Aggiungere il rapporto desiderato di hAstros dissociati e hNeurons o iNeurons in un volume totale di due millilitri a ciascun pozzetto di una micropiastra. Centrifugare la piastra a 100 vo
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