Un metodo in vitro per generare scaffold di astrociti all'interno di microcolonne di idrogel

Prendere una capsula di coltura contenente una barca a microcolonna comprendente tubi cavi di diametro definito.

Le microcolonne, costituite da un idrogel, sono riempite con un tampone per evitare l'essiccazione.

Sotto uno stereomicroscopio, rimuovere il tampone e aggiungere una soluzione di collagene ghiacciato, un componente della matrice extracellulare.

Introdurre un terreno lungo il bordo interno del piatto per mantenere l'idratazione della colonna. Incubare in condizioni fisiologiche per la polimerizzazione del collagene, formando un rivestimento all'interno delle microcolonne.

Aggiungere astrociti all'interno delle microcolonne e incubare per favorire l'adesione degli astrociti al collagene.

Quindi, riempi il piatto con il terreno e mantienilo in condizioni fisiologiche.

A causa del diametro stretto delle microcolonne, gli astrociti acquisiscono una morfologia bipolare con processi che si estendono per tutta la lunghezza.

Nel corso del tempo, gli astrociti si autoassemblano per formare un'impalcatura tridimensionale contenente densi fasci di processi astrocitivi.

L'impalcatura per astrociti rivestita in idrogel è pronta per i saggi a valle.

All'interno di una cappa di biosicu