Sviluppo di organoidi nervosi motori derivati da iPSC umane utilizzando un chip microfluidico

Prendiamo le cellule staminali pluripotenti indotte umane, o iPSC, in un terreno di cellule staminali ricco di sostanze nutritive con inibitori della Rho-chinasi.

Gli inibitori entrano nelle cellule e bloccano gli enzimi Rho-chinasi, prevenendo la morte cellulare apoptotica.

Le cellule utilizzano i nutrienti per proliferare e aggregarsi spontaneamente per formare un ammasso cellulare tridimensionale chiamato sferoide.

A poco a poco, sostituisci il mezzo con un mezzo di induzione neurale. I modulatori di segnalazione provenienti dal mezzo guidano la differenziazione delle cellule staminali in cellule neurali.

Sostituire con un mezzo neurale ricco di fattori di crescita per differenziare le cellule sferoidi in motoneuroni e formare uno sferoide motoneurone o MNS.

Trasferire questi MNS in un chip microfluidico rivestito di polimero contenente un mezzo di maturazione.

I fattori di crescita nervosi nel mezzo stimolano gli assoni o le proiezioni più lunghe dei neuroni a crescere dallo sferoide e ad estendersi attraverso il microcanale del chip.

Questo forma un organoide nervoso motore, un modello tridimensionale del tessuto nervoso motore.

Per indurre la differenziazione delle cellule iP