Riprogrammazione diretta delle cellule progenitrici ematopoietiche in cellule staminali neurali
JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 3:05 min. • July 8th, 2025
Iniziare con una sospensione cellulare di cellule progenitrici ematopoietiche geneticamente modificate.
Queste cellule esprimono i fattori di trascrizione necessari per la loro riprogrammazione in cellule staminali neurali. Questo processo è chiamato riprogrammazione diretta.
Trasferire le cellule in una piastra multipozzetto rivestita di matrice extracellulare con un mezzo progenitore neurale e incubare.
La matrice extracellulare fornisce un'impalcatura tridimensionale per l'adesione e la crescita cellulare.
Durante l'incubazione, i fattori di trascrizione espressi dalla cellula progenitrice ematopoietica avviano una sequenza di eventi molecolari che ne permettono la trasformazione in cellula staminale neurale.
Il mezzo progenitore neurale contiene fattori che favoriscono la sopravvivenza delle cellule staminali neurali indotte.
Dopo l'incubazione, sostituire questo terreno con un nuovo terreno progenitore neurale per promuovere la moltiplicazione cellulare.
Staccare le cellule utilizzando un raschietto per cellule.
Raccogli questa sospensione e trasferisci le cellule in un pozzetto contenente terreno di cellule staminali neurali.
Incubare per il mantenimento delle cellule stamina
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