Differenziazione di una linea cellulare di neuroblastoma umano in neuroni maturi
JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 5:08 min. • July 8th, 2025
Inizia con una linea cellulare di neuroblastoma indifferenziato che comprende cellule simili a neuroni e simili a epiteliali in un mezzo ad alta concentrazione di siero.
Rimuovere il terreno e aggiungere un terreno di differenziazione contenente una concentrazione sierica ridotta, integrato con acido retinoico.
La deprivazione sierica impedisce la proliferazione cellulare epiteliale.
L'acido retinoico induce l'espressione genica neuronale nelle cellule neuronali, trasformandole in un fenotipo più differenziato.
Aggiungere un cocktail di tripsina-EDTA per staccare le cellule parzialmente differenziate.
Aggiungere terreni contenenti proteine sieriche per bloccare la tripsina.
Placcare le cellule e introdurre un nuovo mezzo di differenziazione contenente acido retinoico e un livello sierico ulteriormente ridotto.
Le cellule continuano a sviluppare processi estesi.
Aggiungere la tripsina per staccare le cellule.
Successivamente, aggiungi terreni per bloccare la tripsina e piastrano le cellule su un piatto rivestito di proteine della matrice extracellulare per promuovere l'adesione cellulare.
Infine, integrare con un terreno privo di siero contenente fattori di crescita neuronali.
Quest
Visualizza la trascrizione completa e accedi a migliaia di video scientifici