JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 4:01 min. • July 8th, 2025
Prendi i gangli sensoriali prelavati in un tubo.
Aggiungere una soluzione di dissociazione contenente una miscela di enzimi digestivi e incubare.
Questi enzimi scompongono la matrice extracellulare, rilasciando singole cellule.
Dopo l'incubazione, rimuovere la soluzione di dissociazione.
Lavare i gangli con un tampone fosfato e aggiungere una soluzione di dissociazione fresca.
Pipettare i gangli su e giù per dissociare le cellule.
Passare la sospensione attraverso un colino cellulare per rimuovere eventuali grumi.
Raccogliere le cellule rimanenti dal fondo del colino e inserirle nella provetta.
Sovrapporre la sospensione cellulare su una provetta a gradiente di densità e centrifugare.
In base alle differenze di forma e massa, le cellule migrano verso lo strato inferiore, mentre i detriti cellulari rimangono nello strato superiore.
Scartare lo strato superiore.
Aggiungere il terreno fresco alla sospensione cellulare rimanente e centrifugare.
Scartare il surnatante e conservare le cellule dei gangli sensoriali per un ulteriore utilizzo.
Dopo aver raccolto i gangli sensoriali, aspirare 500 microlitri di soluzione di dissociazione dei gangli da ciascuna provetta senza disturbare i gang
Visualizza la trascrizione completa e accedi a migliaia di video scientifici