Un metodo modificato del tubo a rullo per la coltura a lungo termine di fette di cervello di roditore

Prendi fette di cervello ottenute da un cervello di roditore. Le fette sono costituite dall'ippocampo, che contiene i neuroni dell'ippocampo.

Trasferisci le fette di cervello su vetrini coprioggetti contenenti plasma di pollo.

Applicare il plasma mescolato con trombina sulle fette. La trombina induce la coagulazione plasmatica, creando un'impalcatura biologica che favorisce l'adesione delle fette ai vetrini.

Prendi tubi a rullo a lato piatto con un foro sul lato piatto e un disco adesivo attaccato attorno al foro all'esterno dei tubi.

Posizionare i vetrini coprioggetti sui dischi adesivi, assicurandosi che le fette di cervello siano rivolte verso l'interno delle provette.

Aggiungere un terreno di coltura neuronale alle provette e far fluire in una miscela di anidride carbonica e aria.

Tappare le provette, inserirle in una griglia a rulli e incubarle con un movimento rotatorio.

L'aerazione fornita dall'incubazione a rotazione e i nutrienti del terreno supportano la coltura a lungo termine delle fette di cervello.

Per iniziare, preparare la cremagliera del tubo del rullo e creare una maschera per facilitare la perforazione di un foro nei tubi del rullo, come descritto nel protocollo