Sviluppo di un modello di coltura a tripla cellula della barriera emato-encefalica umana

Inizia aggiungendo periciti sul lato inferiore dell'inserto del pozzetto.

Coprire l'inserto a pozzetti con una piastra di coltura e incubare.

I periciti si attaccano alla membrana dell'inserto del pozzetto, formando uno strato di una singola cellula o un monostrato.

Prendi un altro piatto di coltura.

Aggiungi astrociti umani al pozzetto in un mezzo adatto. Quindi, incubare la piastra.

Gli astrociti si attaccano al fondo del pozzetto e formano un monostrato.

Scartare il terreno e aggiungere astrociti e periciti freschi.

Ora, prendi la piastra di coltura contenente l'inserto del pozzetto con lo strato di periciti.

Capovolgere la piastra e trasferire l'inserto del pozzetto nel pozzetto contenente lo strato di astrociti.

Aggiungere le cellule endoteliali del cervello umano sul lato superiore dell'inserto e incubare.

Le cellule endoteliali si attaccano all'inserto del pozzetto, formando un sistema di coltura a tripla cellula che assomiglia alla barriera emato-encefalica, un'interfaccia cruciale che separa il flusso sanguigno e il cervello.

Iniziare coltivando l'HBVP in fiasche di coltura T75 con una superficie attivata per l'adesione cellulare all'interno di un incubatore al 5% di anidr