JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 4:02 min. • July 8th, 2025
Inizia con le gliomasfere, aggregati cellulari derivati da un tumore cerebrale o glioblastoma.
Aggiungere enzimi di dissociazione. Incubare per separare le cellule del glioblastoma e ottenere una sospensione unicellulare.
Successivamente, introdurre un terreno di coltura arricchito con siero per fermare l'attività enzimatica.
Centrifugare e rimuovere il surnatante, quindi risospendere le cellule.
Filtrare la sospensione, quindi centrifugare e rimuovere il surnatante.
Risospendere le cellule nei precursori dell'idrogel che contengono piccoli peptidi.
Caricare questa miscela nei pozzetti con uno stampo in silicone preassemblato contenente acido ialuronico.
Mescola la soluzione. Incubare per consentire l'interazione tra l'acido ialuronico e i precursori dell'idrogel, formando un idrogel che facilita l'intrappolamento cellulare.
Sovrapporre l'idrogel con terreni di coltura per sostenere la sopravvivenza cellulare.
Dopo aver smontato lo stampo, incubare l'idrogel.
All'interno dell'idrogel, le proteine di adesione sulle cellule interagiscono con i peptidi precursori e l'acido ialuronico.
Questo fa sì che le cellule formino piccoli grappoli e sviluppino una coltura tridimensionale.
Per in
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