Generazione di una coltura di organoidi da una sospensione di cellule tumorali cerebrali

Inizia con una provetta da microcentrifuga contenente una matrice extracellulare ricca di laminina o lrECM. La laminina è un componente strutturale presente in abbondanza nel cervello.

Tenere il tubo sul ghiaccio per evitare la polimerizzazione IrECM.

Aggiungere le cellule tumorali cerebrali e mescolare accuratamente per garantire una distribuzione uniforme delle cellule.

Successivamente, trasferire il composto su stampi in parafilm, formando delle goccioline.

Incubare per facilitare la polimerizzazione della lrECM per formare un'impalcatura, imitando l'ambiente naturale delle cellule.

Ora, sciacquare gli organoidi solidificati in una capsula di Petri contenente un terreno di coltura, quindi incubare.

Il terreno di coltura fornisce nutrienti essenziali e fattori di crescita, supportando la divisione cellulare.

All'interno dell'organoide, le cellule si auto-organizzano migrando e invadendo.

Dopo l'incubazione, inclinare la piastra per depositare gli organoidi.

Rimuovere con cura il terreno in eccesso e aggiungere il terreno fresco.

Incubare agitando delicatamente.

Questo distribuisce i nutrienti in modo uniforme e migliora la crescita degli organoidi.

Per produrre organoidi da una s