Differenziazione delle cellule progenitrici neurali del midollo spinale in motoneuroni
JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:16 min. • July 8th, 2025
Inizia con una piastra di coltura rivestita con un polimero sintetico e una proteina di adesione.
Aggiungere cellule progenitrici neurali del midollo spinale risospese in un mezzo di differenziazione dei motoneuroni, integrato con un inibitore di piccole molecole.
La superficie della piastra rivestita facilita l'adesione delle cellule.
L'inibitore a piccola molecola blocca specifiche protein chinasi, prevenendo l'apoptosi cellulare.
Rimuovere il terreno esaurito e aggiungere un nuovo mezzo di differenziazione.
Il terreno contiene un composto che promuove la differenziazione dei progenitori neurali in progenitori dei motoneuroni.
Inoltre, emergono progenitori gliali impegnati.
Successivamente, sostituire con un mezzo di differenziazione integrato con un inibitore della sintesi del DNA.
Questi inibitori inducono selettivamente il danno al DNA e la morte nei progenitori gliali, mentre i progenitori dei motoneuroni si differenziano in neuroni maturi.
Lavare le cellule con tampone e aggiungere il mezzo di differenziazione senza inibitori per mantenere i neuroni.
Durante la coltivazione, sostituire regolarmente il terreno per reintegrare i nutrienti.
Inoltre, sostituire il terreno con un
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