Differenziazione delle cellule staminali neurali in neuroni utilizzando un dispositivo microfluidico compartimentalizzato

Prendiamo un dispositivo microfluidico costituito da pozzetti serbatoio collegati a due compartimenti, uno somatico e uno assonale, separati da una barriera di microsolchi.

Gli scomparti e le microscanalature sono rivestiti con un substrato di coltura cellulare per facilitare l'adesione cellulare.

Aggiungere un terreno di coltura di cellule staminali neurali a ciascun pozzetto e incubare per precondizionare il dispositivo per la coltura cellulare.

Eliminare il supporto. Aggiungere cellule staminali neurali, o NSC, ai pozzetti del compartimento somatico e lasciare che le cellule aderiscano.

Aggiungere il terreno NSC a ciascun pozzetto e incubare in una camera umidificata per evitare l'evaporazione del terreno. Durante l'incubazione, le NSC proliferano.

Sostituire il terreno NSC con un mezzo di differenziazione neurale e incubare.

Le piccole molecole nel mezzo inducono la differenziazione delle NSC in neuroni all'interno del compartimento somatico, con i loro assoni che si estendono attraverso i microsolchi nel compartimento assonale.

I neuroni differenziati con assoni estesi sono pronti per ulteriori saggi.

Per iniziare, sciogliere la poli-l-ornitina in acqua distillata per colture