JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 3:49 min. • July 8th, 2025
Inizia con un muscolo della testa di topo e taglialo in frammenti.
Aggiungere un cocktail di enzimi proteolitici e incubare agitando delicatamente.
Gli enzimi digeriscono la matrice extracellulare del tessuto, allentando le fibre muscolari.
Aggiungere terreni contenenti proteine del siero per inattivare gli enzimi.
Trasferire il fazzoletto in una provetta, centrifugare e scartare il surnatante.
Risospendere il tessuto in un terreno. Ripetere la disgregazione meccanica e la centrifugazione due volte per ottenere una sospensione omogenea di cellule satelliti, cellule staminali cruciali per la riparazione e la rigenerazione muscolare.
Raccogli il surnatante contenente la cellula satellite.
Passare attraverso un colino cellulare per ottenere una sospensione a cellula singola. Centrifugare, scartare il surnatante e risospendere le cellule nel terreno.
Posizionare le gocce della sospensione cellulare sui pozzetti di scorrimento della camera rivestiti di proteine della matrice extracellulare.
La superficie rivestita facilita l'attacco delle celle satellitari. Aggiungere il terreno ai pozzetti.
I fattori di crescita nei mezzi inducono la proliferazione e la differenziazione delle cellule s
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