JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 4:02 min. • July 8th, 2025
Prendi una sospensione di cellule di carcinoma embrionale di topo in grado di differenziarsi in vari tipi di cellule.
Semina le cellule su una piastra di coltura idrofobica contenente terreni e acido retinoico.
incubare. Le superfici idrofobiche impediscono l'adesione cellulare, causando la formazione di aggregati.
L'acido retinoico entra negli aggregati cellulari, innescando vie di segnalazione e causando la differenziazione in cellule progenitrici neuronali.
Dopo l'incubazione, raccogliere gli aggregati cellulari.
Eliminare il supporto.
Aggiungere terreni contenenti acido retinoico e seminare gli aggregati su un piatto di coltura idrofobo.
incubare. L'acido retinoico facilita la differenziazione cellulare sostenuta nei neuroni.
Raccogliere gli aggregati e rimuovere i file multimediali.
Aggiungere un enzima proteolitico per interrompere le aderenze cellula-cellula all'interno degli aggregati.
Aggiungere terreni contenenti siero per fermare l'attività enzimatica.
Dissociano meccanicamente gli aggregati, formando una sospensione neuronale.
Centrifugare e scartare il surnatante ricco di enzimi.
Risospendere i neuroni in un terreno e seminarli su una piastra aderente a più pozzetti co
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