Isolamento delle pieghe neurali craniche da un embrione di pollo per una coltura di cellule neurali in cresta

Prendi un embrione di pollo supportato da una cornice di carta da filtro e posizionalo sotto un microscopio da dissezione.

Rimuovere la membrana vitellina, un rivestimento protettivo che circonda l'embrione.

Identificare le pieghe neurali del mesencefalo situate posteriormente ai lobi ottici e anteriormente alla mezzaluna cardiaca, il precursore embrionale del cuore maturo.

Le pieghe neurali contengono cellule della cresta neurale premierarie, che sono cellule staminali multipotenti che si trasformano in cellule migratorie durante lo sviluppo.

Queste cellule migratorie si differenziano in cellule neuronali e non neuronali.

Asportare l'aspetto più dorsale delle pieghe neurali e trasferire il tessuto in una piastra di coltura contenente tampone.

Quindi, posizionare i vetrini coprioggetti rivestiti con una proteina di adesione nei pozzetti della piastra di coltura contenenti terreni.

Trasferisci le pieghe neurali sui vetrini coprioggetti rivestiti. Incubare per facilitare l'adesione dei tessuti.

Durante la coltivazione, le cellule della cresta neurale migratoria emergono dalle pieghe neurali sulla superficie rivestita, stabilendo una coltura cellulare della cresta neurale.

Trasferisci