Isolamento dei neuroni gangliari vestibolari da un orecchio interno di topo

Prendi metà della testa di un cucciolo di topo e rimuovi il cervello.

Taglia la parte superiore del cranio e asporta il tessuto circostante per visualizzare la capsula otica, uno strato esterno osseo che protegge le strutture dell'orecchio interno.

Trasferire il tessuto in una piastra di coltura contenente un terreno tamponato.

Separare i gangli vestibolari superiori e inferiori, che contengono i corpi cellulari nervosi vestibolari.

Radere la cresta ossea e raccogliere il ganglio superiore sottostante.

Trasferire il ganglio superiore in una piastra fresca contenente il mezzo tamponato.

Rimuovere i tessuti aderenti dalla superficie per pulire il ganglio isolato.

Porre il ganglio in una soluzione contenente enzimi proteolitici.

Gli enzimi degradano la matrice extracellulare del tessuto, allentando le cellule.

Trasferire il ganglio in una capsula con fondo di vetro rivestita di polimero contenente terreno di coltura e dissociare meccanicamente il tessuto per rilasciare le cellule.

Incubare, permettendo alle cellule di aderire e stabilire una coltura di neuroni gangliari vestibolari.

Estrarre il cervello del topo soppresso usando le forbici chirurgiche chiuse. Recidere e rimuovere il n