Un metodo per l'isolamento delle unità neurovascolari dal cervello di ratto

Inizia con un mortaio di vetro freddo contenente tessuto cerebrale corticale di ratto, che è lo strato più esterno del cervello.

Aggiungere un tampone per microvasi cerebrali o BMB, contenente inibitori della proteasi.

Ora, muovi il pestello su e giù per dissociare il tessuto.

Questa agitazione rilascia le unità neurovascolari, o NVU, che comprendono microvasi, periciti, neuroni e cellule gliali. Gli inibitori della proteasi bloccano le proteasi rilasciate, proteggendo i microvasi.

Trasferite il composto in un tubo.

Aggiungere una soluzione polisaccaridica densa. Utilizzare un vortice per mescolare uniformemente la soluzione con altri contenuti.

centrifuga. I polisaccaridi densi consentono la sedimentazione delle NVU, che sono più dense dei detriti tissutali.

Scartare il surnatante e risospendere le NVU in BMB contenenti inibitore della proteasi e soluzione polisaccaridica.

Usa il vortice per mescolare il contenuto.

Ripetere il processo di centrifugazione. Eliminare il surnatante per rimuovere eventuali detriti residui.

Risospendere le NVU in BMB e memorizzarle per ulteriori analisi.

Metti il tessuto cerebrale corticale in un mortaio di vetro freddo. Quindi, aggiungere 5 millilitri