Isolamento di oligodendrociti primari murini mediante microsfere immunomagnetiche

Prendi una sospensione di cellule neurali, inclusi oligodendrociti immaturi e cellule neuronali primarie, da un cucciolo di topo.

Risospendere le cellule in un tampone di smistamento magnetico per evitare l'aggregazione delle cellule.

Aggiungi microsfere magnetiche ingegnerizzate che trasportano anticorpi anti-O4 sulla loro superficie. Agitare la soluzione per garantire una miscelazione uniforme.

Incubare per consentire alle microsfere di legarsi con il galattolipidide solfato, un antigene O4 sugli oligodendrociti, mentre le altre cellule rimangono non legate o debolmente legate.

Lavare la miscela con un ulteriore tampone di selezione delle cellule.

Centrifugare e scartare il surnatante, quindi risospendere le cellule.

Successivamente, passare le celle legate a perline in una colonna di separazione magnetica dotata di un filtro che rimuove i grumi di cellule più grandi.

Durante la corsa, sotto un campo magnetico, i complessi legati alle perle si muovono verso il magnete, attaccandosi ai lati.

Lavare per rimuovere le cellule non legate e quelle debolmente legate.

Recuperare la colonna dal separatore e lavarla con un mezzo di proliferazione per raccogliere gli oligodendrociti primari