Isolamento delle cellule immunitarie dai plessi coroidi di topo

Posiziona il cervello di un topo con il lato dorsale rivolto verso l'alto.

Al microscopio, separare gli emisferi cerebrali. Tirare via la corteccia e poi l'ippocampo per esporre i ventricoli laterali e il terzo ventricolo.

Raccogli due plessi coroidei laterali. Si tratta di strutture cerebrali ricche di cellule immunitarie che rivestono i ventricoli laterali come un lungo velo.

Raccogli il terzo plesso coroideo ventricolare, che è una struttura corta con una superficie granulare.

Staccare il cervelletto per esporre il quarto ventricolo.

Raccogli il plesso coroideo del quarto ventricolo, che è una lunga struttura globulare con una superficie granulare.

Mettere tutti i plessi coroidei in una provetta con soluzione fisiologica tamponata per mantenere l'integrità dei tessuti.

Aggiungere una soluzione di enzimi digestivi e incubare agitando.

L'enzima rompe la matrice extracellulare e allenta le cellule.

Aggiungere un tampone adatto per inattivare l'enzima.

Centrifuga per la sedimentazione delle cellule. Scartare il surnatante e risospendere le cellule in un tampone fresco per ulteriori analisi.

Per iniziare, posizionare il cervello sezionato da un topo C57 nero 6 con il lato dorsale riv