Generazione di un chip barriera emato-encefalica utilizzando cellule precursori derivate da iPSC

Prendiamo un chip microfluidico con canali sovrapposti, rivestiti di matrice, separati da una membrana porosa.

Semina le cellule progenitrici neurali derivate da iPSC nel canale superiore. Incubare per l'aderenza cellulare, quindi lavare per rimuovere le cellule non attaccate.

Successivamente, seminare cellule endoteliali microvascolari cerebrali derivate da iPSC nel canale inferiore.

Capovolgere il chip e incubarlo per collegare le cellule endoteliali al lato della membrana del canale inferiore.

Quindi, capovolgi il chip per attaccare le celle al lato inferiore del canale, formando una struttura tubolare monostrato. Lavare entrambi i canali con terreni specifici per cellule.

Fluiscono continuamente un mezzo di differenziazione neurale nel canale superiore e un mezzo cellulare endoteliale nel canale inferiore.

Le cellule endoteliali utilizzano fattori di crescita dal mezzo alla maturità e formano giunzioni strette simili a un vaso sanguigno, formando il lato del sangue.

I fattori neurotrofici guidano la differenziazione delle cellule progenitrici neurali in varie cellule cerebrali, formando il lato cerebrale. Queste cellule interagiscono con le cellule endoteliali, creando una barr