Preparazione di fette di corteccia rinale-ippocampo da un cervello di cucciolo di ratto

Prendi un cervello di cucciolo di ratto appena raccolto, con la parte dorsale rivolta verso l'alto, in una piastra di coltura con tampone refrigerato.

Apri gli emisferi cerebrali e rimuovi i tessuti che ricoprono l'ippocampo.

Incidere gli emisferi in modo che contengano l'ippocampo e la corteccia rinale.

Posizionare entrambe le semisfere con l'ippocampo rivolto verso l'alto e parallelo su una carta da filtro.

Trasferire questo gruppo in un tritatutto con la lama perpendicolare agli emisferi.

Tagliare gli emisferi allo spessore richiesto per ottenere le fette e trasferirle su una piastra di coltura con tampone refrigerato.

Separare attentamente le fette e sezionarle per includere le regioni strutturalmente intatte della corteccia ippocampale e rinale.

Trasferire le fette in inserti membranosi in una piastra a più pozzetti contenente il terreno.

Rimuovere il tampone in eccesso dalle fette e incubarle per il recupero dei tessuti.

Aggiorna il file multimediale. Le fette possono essere utilizzate per ulteriori analisi.

Trasferisci il cervello, con il lato dorsale rivolto verso l'alto, in una piastra da 60 millimetri contenente 5 millilitri di GBSS freddo. Inserire una pinza sottile nel