Definizione di una configurazione a cella intera tramite il metodo Patch Clamp

0 visualizzazioni • 3:12 min. • July 8th, 2025

Inizia con una fetta di cervello di topo immobilizzata posizionata in una camera di registrazione della configurazione elettrofisiologica riempita con un liquido cerebrospinale artificiale per mantenere la vitalità neuronale.

La configurazione contiene una micropipetta di registrazione preassemblata riempita di soluzione cationica collegata a un amplificatore e a un'unità di controllo della pressione.

Al microscopio, individuare un neurone e posizionare la micropipetta vicino ad esso.

Applicare una pressione positiva dell'aria per rimuovere eventuali detriti.

Spostare la micropipetta verso il neurone fino a formare una fossetta sulla membrana, che indica la vicinanza neuronale.

Applicare un'aspirazione debole per estrarre un piccolo cerotto a membrana all'interno della micropipetta.

Questo crea una tenuta ermetica che aumenta la resistenza della micropipetta, confermando una tenuta stabile.

Mantenere il potenziale della cellula a un potenziale di riposo fisiologico per la stabilità cellulare.

Quindi, applicare un'aspirazione breve e forte per interrompere la membrana del cerotto, stabilendo una connessione diretta con l'interno della cellula.

Questa configurazione dell'intera cellu

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Patch clamp in configurazione whole-cell