JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:29 min. • July 8th, 2025
Prendi un vetrino coprioggetti contenente una coltura neuronale modellata in 1D.
I neuroni sono caricati con un colorante indicatore di calcio, che diventa fluorescente al legame con il calcio.
Trasferire il vetrino coprioggetti in una camera di imaging per microscopio a fluorescenza contenente una soluzione di registrazione extracellulare.
Assemblare un supporto con due elettrodi a filo parallelo separati da una distanza.
Capovolgere il supporto e posizionarlo sopra la coltura neuronale con gli elettrodi immersi nella soluzione di registrazione.
Collegare gli elettrodi a un amplificatore. Applicare un'onda quadra bipolare pulsata non CC per generare un campo elettrico unidirezionale uniforme attraverso i neuroni senza causare lesioni.
Il campo elettrico generato eccita i neuroni, innescando un potenziale d'azione.
Il potenziale d'azione viaggia lungo l'assone, attivando i canali del calcio voltaggio-dipendenti e causando l'afflusso di calcio nel terminale del neurone. Inoltre, i neurotrasmettitori vengono rilasciati nella sinapsi, facilitando la trasmissione sinaptica.
In seguito all'afflusso di ioni calcio, questi ioni si legano al colorante intracellulare e diventano fluorescent
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