JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:07 min. • July 8th, 2025
Prendiamo un array multielettrodo sterile o MEA, un dispositivo che registra l'attività elettrica delle cellule bersaglio.
Aggiungere una soluzione polimerica al MEA e incubare.
Il polimero riveste la superficie del MEA, aumentando così la proprietà di attrazione dell'acqua della superficie.
Rimuovere il polimero in eccesso e lavare con acqua deionizzata.
Aggiungere la matrice extracellulare, o ECM, e incubare per consentirgli di rivestire il MEA. Rimuovere l'ECM in eccesso.
Successivamente, aggiungi le sfere di cocoltura 3D che comprendono neuroni e astrociti in un mezzo adatto.
Incubare per consentire alle sfere di aderire alla superficie del MEA.
Posizionare il MEA su uno stadio di testa a temperatura controllata di un sistema MEA e registrare l'attività elettrica spontanea attraverso gli elettrodi.
L'attività elettrica misurata corrisponde alla comunicazione alle giunzioni neurali all'interno della sfera.
Inizia rivestendo la superficie di ciascun array multielettrodo o MEA con 1 millimetro di poli-ornitina per rendere la superficie idrofila e incuba a 37 gradi Celsius per un minimo di quattro ore. Dopo l'incubazione, rimuovere la poliornitina e lavare la superficie di ciascun MEA con acqua deionizzata. Quindi, aggiungere 1 millilitro di matrice extracellulare e rimettere nell'incubatrice per un minimo di quattro ore.
Quando è pronta, rimuovere la matrice extracellulare, quindi applicare le sfere in 1,5 millilitri di terreno sulla superficie MEA, assicurandosi che le sfere siano posizionate sopra l'array di elettrodi. Lasciare aderire per due giorni. Per misurare l'attività elettrica delle sfere neurali, posizionare il MEA su uno stadio di testa a temperatura controllata.