JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
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Inizia con una camera di registrazione del comportamento contenente una larva di pesce zebra anestetizzata e transgenica immobilizzata in un agarosio a basso punto di fusione.
La regione pretectum del mesencefalo della larva e il lobo inferiore dell'ipotalamo contengono neuroni modificati che esprimono indicatori fluorescenti di calcio.
Rimuovere l'agarosio intorno alla testa della larva e lavare con acqua per rimuovere eventuali residui di agarosio.
Posiziona un paramecio come preda vicino alla larva.
Trasferire la camera di registrazione al microscopio a fluorescenza.
Mentre la preda nuota, l'occhio della larva la rileva e invia un segnale alle regioni del pretectum e dell'ipotalamo coinvolte nel rilevamento della preda.
Questo apre i canali del calcio in questi neuroni, consentendo agli ioni calcio di entrare e legarsi agli indicatori del calcio, portando all'emissione di fluorescenza.
Registra l'imaging time-lapse per rilevare l'intensità della fluorescenza dai neuroni lungo il percorso di nuoto della preda e generare una mappa a colori.
In questa mappa, le punte delle frecce rappresentano le traiettorie delle prede: le frecce nere non mostrano alcuna eccitazione neuronale, men
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