Imaging del calcio in singoli neuroni che regolano il comportamento di deposizione delle uova in Caenorhabditis elegans

0 visualizzazioni • 3:01 min. • July 8th, 2025

Prendete i vermi transgenici Caenorhabditis elegans che crescono su un blocco di agar.

Questi vermi esprimono un indicatore del calcio, GCaMP5, e una proteina fluorescente insensibile al calcio, mCherry, nei neuroni che regolano il comportamento di deposizione delle uova.

Montare i vermi su un tavolino da microscopio invertito.

Visualizza la fluorescenza GCaMP5 e mCherry.

Prima del rilascio dell'uovo, i neuroni si attivano, aprendo i canali del calcio voltaggio-dipendenti, che consentono l'afflusso di calcio.

Il calcio intracellulare si lega a GCaMP5, alterandone la conformazione e aumentando la fluorescenza.

Nel frattempo, la fluorescenza di mCherry rimane invariata, consentendo il tracciamento del neurone.

I neuroni attivati rilasciano neurotrasmettitori che si legano a specifici recettori muscolari, innescando il rilascio dell'uovo.

Dopo il rilascio, i canali del calcio si chiudono, riducendo l'afflusso di calcio e la fluorescenza GCaMP5.

Quindi, cattura immagini in campo chiaro per osservare il movimento dei vermi.

La riduzione del movimento si verifica a causa delle contrazioni muscolari prima del rilascio dell'uovo.

Dopo il rilascio dell'ovulo, i muscoli si rilassano, riprist

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