JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 3:06 min. • July 8th, 2025
Prelevare una fetta coronale di topo trasfettata immobilizzata in una camera di registrazione perfusa con aCSF.
La fetta contiene una popolazione di neuroni piramidali sparsi che esprimono un enzima bersaglio e una proteina fluorescente.
Assemblare una pipetta di registrazione comprendente una soluzione intracellulare e un elettrodo collegato a un amplificatore per misurare i segnali neuronali.
Identificare al microscopio l'area del tessuto bersaglio e localizzare un neurone fluorescente.
Applicare una pressione positiva sulla pipetta per evitare l'intasamento e farla avanzare verso il neurone bersaglio.
La pressione positiva provoca una leggera rientranza sulla membrana neuronale al contatto.
Rilasciare la pressione, formando una tenuta ermetica tra la membrana e la punta.
Impostare il potenziale di tenuta su un valore negativo costante per stabilizzare il neurone.
Applicare una breve pressione negativa per rompere la membrana, collegando il citoplasma all'interno della pipetta e stabilendo una configurazione dell'intera cellula.
Passa alla modalità di pinza di corrente e applica impulsi di corrente positiva, generando potenziali d'azione indicativi di eccitabilità neuronale.
Tras
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