Registrazione ottica dell'attività neuronale in fette di cervello colorate con un colorante sensibile alla tensione

Prendi una fetta di cervello di topo immobilizzato colorato con un colorante sensibile alla tensione o VSD, molecole fluorescenti che si integrano nella membrana neuronale e rispondono ai cambiamenti del potenziale di membrana.

Posizionare la fetta in una camera di registrazione.

Installare l'elettrodo di terra per un riferimento di tensione di base.

Successivamente, posizionare gli elettrodi di stimolazione e registrazione sulla fetta.

Applicare un impulso elettrico.

L'impulso stimola i neuroni, innescando l'apertura del canale del sodio voltaggio-dipendente e l'afflusso di ioni sodio, portando a un cambiamento del potenziale di membrana.

Ciò induce un potenziale d'azione, misurato dall'elettrodo di registrazione, e altera le proprietà fluorescenti del VSD.

Esporre la fetta di cervello a una lunghezza d'onda specifica per eccitare il VSD e innescare l'emissione di fluorescenza.

Dopo la stimolazione, i canali del sodio si chiudono mentre i canali del potassio voltaggio-dipendenti si aprono, favorendo l'efflusso di ioni potassio.

Questo cambia nuovamente il potenziale di membrana e di conseguenza altera la fluorescenza del VSD.

Registra la fluorescenza in tempo reale per rappresenta