JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 6:22 min. • July 8th, 2025
Prendete la testa mozzata di un topo geneticamente modificato. L'epitelio olfattivo nel naso contiene neuroni sensoriali olfattivi, o OSN, con recettori degli odori marcati con fluorofori.
Rimuovere la pelle e sezionare la testa per isolare il setto con epitelio olfattivo attaccato.
Separare e fissare l'epitelio in una camera di registrazione.
Utilizzando un microscopio a fluorescenza, rileva i recettori marcati per colpire la manopola dendritica degli OSN.
Portare una pipetta di registrazione con una soluzione intracellulare contenente nistatina, un antibiotico perforante la membrana.
Applicare una pressione positiva per evitare l'intasamento della pipetta. Inserire la pipetta nell'epitelio e avvicinarsi a un OSN.
Passare alla pressione negativa, formando un sigillo con la membrana cellulare. Applicare corrente per mantenere la membrana al potenziale di riposo.
La nistatina perfora la membrana, consentendo la misurazione delle correnti ioniche intracellulari.
Posizionare una pipetta contenente uno stimolante degli odori vicino all'OSN. Rilascia lo stimolante, che si lega ai recettori degli odori, innescando l'apertura del canale ionico per consentire l'afflusso di ioni. Registrare
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