Registrazione dell'attività neurale in topi che si muovono liberamente utilizzando la fotometria a fibre
JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:27 min. • July 8th, 2025
Inizia con un topo che si muove liberamente con una cannula in fibra ottica impiantata.
Collegare un'estremità di un cavo patch in fibra ottica alla cannula e l'altra estremità a una sorgente luminosa di eccitazione.
Il topo esprime un indicatore di calcio geneticamente codificato con fluoroforo verde, o GECI, nell'area ipotalamica laterale, o neuroni LHA.
La fibra ottica impiantata entra in contatto con la regione laterale dell'habenula, o LHb, dove terminano gli assoni LHA.
Eccitare il GECI alla sua lunghezza d'onda di eccitazione ottimale e registrare il segnale di base.
Ora, applica sbuffi d'aria ripetuti al mouse per evocare una risposta avversiva allo stress.
Questo stimolo innesca potenziali d'azione nei terminali degli assoni LHA, aprendo i canali del calcio voltaggio-dipendenti e consentendo l'afflusso di calcio.
Gli ioni calcio intracellulari si legano al GECI, inducendo un cambiamento conformazionale che aumenta l'emissione di fluorescenza verde.
Visualizzare il segnale ottico.
L'aumento della fluorescenza in risposta agli sbuffi d'aria nel topo conferma il ruolo della via LHA-LHb nella trasmissione di segnali avversivi.
Inizia ispezionando l'estremità distale delle fibr
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