JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 3:05 min. • July 8th, 2025
Prendete una fetta di cervello di topo immobilizzato e trasfettato in una camera di registrazione elettrofisiologica perfusa con aCSF ossigenato.
Questa fetta contiene i terminali degli assoni dei neuroni talamici che esprimono canali ionici sensibili alla luce fusi a una proteina fluorescente.
Visualizza gli assoni fluorescenti dei neuroni talamici e seleziona un neurone piramidale.
Far avanzare una pipetta di registrazione contenente un elettrodo in una soluzione intracellulare verso il neurone selezionato con una leggera pressione positiva.
La pressione positiva crea una fossetta sulla membrana neuronale al contatto.
Rilasciare la pressione per formare una tenuta ad alta resistenza.
Impostare il potenziale di membrana su un valore negativo costante.
Applicare un impulso di pressione negativa per rompere la membrana, ottenendo una configurazione a cellula intera.
Illumina i terminali degli assoni, attivando i canali sensibili alla luce e depolarizzando le membrane neuronali, innescando potenziali d'azione.
I neurotrasmettitori eccitatori vengono rilasciati, legandosi ai recettori sul neurone registrato, causando l'afflusso di cationi.
Registrare le correnti post-sinaptiche eccita
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