JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:09 min. • July 8th, 2025
Inizia con un ratto immobilizzato e anestetizzato con un microelettrodo di carbone attivo impiantato nel nucleo accumbens o regione NAc e un filo di riferimento nell'emisfero sinistro.
Questi elettrodi sono collegati a un potenziostato, che misura i segnali elettrici generati dalla dopamina.
Un elettrodo stimolante con una cannula guida viene impiantato nell'area tegmentale ventrale o VTA, mirando ai neuroni dopaminergici che proiettano nella regione NAc.
Applicare impulsi elettrici tramite l'elettrodo stimolante che attiva i neuroni VTA, rilasciando dopamina, un messaggero chimico, nella regione NAc.
Nella regione NAc, la dopamina interagisce con l'elettrodo di carbonio e subisce ossidazione e riduzione, generando segnali elettrici di base.
Inserire una cannula interna nella cannula guida per infondere un attivatore o un farmaco inibitore.
Il farmaco attivatore stimola i neuroni VTA, aumentando il rilascio di dopamina ed elevando i segnali elettrici.
Al contrario, il farmaco inibitorio diminuisce il segnale elettrico impedendo il rilascio di dopamina.
Stimola l'animale ogni tre minuti per 20-30 minuti. Dopo aver raggiunto una linea di base stabile, abbassare delicatamente la cannula interna a mano nella cannula guida, preinserita nello stimolatore bipolare, e ottenere ulteriori due o tre registrazioni di base per confermare che l'inserimento della cannula non ha causato un cambiamento nel segnale evocato.
Una volta stabilita una risposta basale, utilizzare una pompa a siringa in una microsiringa per infondere 0,5 microlitri della soluzione farmacologica di interesse nel VTA per un periodo di due minuti. Dopo l'infusione, lasciare la cannula interna in posizione per almeno un minuto prima della rimozione, continuando a registrare la risposta ogni tre minuti per misurare gli effetti post-infusione.