Registrazioni elettrofisiologiche di neuroni riprogrammati in una fetta di cervello di topo

0 visualizzazioni2:14 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Prendete una fetta coronale di topo immobilizzata geneticamente modificata in una camera di registrazione perfusa con tampone ossigenato.

La fetta contiene la regione striatale, che ha interneuroni riprogrammati da cellule precursori di oligodendrociti marcate da un marcatore interneuronale e dall'espressione di proteine fluorescenti.

Assemblare una pipetta di registrazione costituita da un elettrodo immerso in una soluzione intracellulare.

Identificare microscopicamente un interneurone fluorescente.

Mantenere una pressione positiva nella pipetta e farla avanzare verso l'interneurone bersaglio, a contatto con la membrana.

Applicare una pressione negativa per formare una tenuta ad alta resistenza.

Applicare impulsi di pressione negativa per rompere la membrana, stabilendo una configurazione dell'intera cellula.

Mantenere il potenziale di membrana dell'interneurone a un valore negativo costante.

Applicare brevi correnti incrementali, aprendo i canali ionici e modificando il potenziale di membrana, innescando un potenziale d'azione.

Alla fine, la membrana ritorna al potenziale di riposo.

Osservare questi cambiamenti nel potenziale di membrana in risposta all'iniezione di corrente, indicando la maturazione neuronale e la riprogrammazione di successo.

Dopo aver trasferito una sezione di tessuto in una camera di registrazione per l'elettrofisiologia, montare la pipetta di vetro sull'elettrodo di registrazione e immergerla nella soluzione. Ricontrollare la resistenza dell'elettrodo. Quindi, avvicinarsi lentamente alla cella riprogrammata con la pipetta, mantenendo una leggera pressione positiva nell'elettrodo per evitare di ostruire il puntale, e verificare che la cella sia GFP-positiva prima di applicare il patch.

Quando la cella è patchata, mantenere la cella in pinza di corrente da meno 60 a meno 70 millivolt e iniettare correnti di 500 millisecondi da meno 20 a più 90 picoampere con incrementi di 10 picoampere per indurre potenziali d'azione. Questo è indicativo di una maturazione neuronale e di una riprogrammazione di successo.

07:23

Registrazioni Whole-cell patch-clamp nel cervello fette

Video correlati

0 Visualizzazioni

11:52

Registrazioni Patch-clamp intere cellule delle cellule epiteliali primarie isolate dall'epididimo

Video correlati

0 Visualizzazioni

09:23

Risposta uditiva del tronco cerebrale ed esterna della cellula ciliata cellule intere Patch Clamp registrazione in ratti postnatali

Video correlati

0 Visualizzazioni

03:52

Uno studio elettrofisiologico delle sinapsi retinogenicolate e corticogenicolate in fette di cervello di topo

Video correlati

0 Visualizzazioni

03:05

Fotostimolazione e registrazioni di patch clamp a cellule intere di neuroni in fette di ippocampo di topo

Video correlati

0 Visualizzazioni

03:18

Stimolazione optogenetica e registrazione elettrofisiologica di eventi sinaptici in fette di cervello di ratto

Video correlati

0 Visualizzazioni

10:04

Applicazione locale di farmaci allo studio delle funzioni recettore nicotinico in fettine di cervello del mouse

Video correlati

0 Visualizzazioni

09:39

Stimolazione diretta correnti e multi-elettrodo Array registrazione di sequestro simile attività nei topi cervello fetta di preparazione

Video correlati

0 Visualizzazioni

10:53

Preparazione di fettine di cervello acuto utilizzando un' ottimizzata N-metilico-D-metodo di ripristino protettivo glucamine

Video correlati

0 Visualizzazioni

10:35

Imaging del due-fotone calcio nei dendriti neuronali nelle fette del cervello

Video correlati

0 Visualizzazioni

Ultimo aggiornamento: 1 agosto 2026