Installazione di finestre ottiche nel cervello di topi transgenici per l'imaging delle attività neurali

0 visualizzazioni • 4:49 min. • July 8th, 2025

Inizia con un topo anestetizzato e geneticamente modificato con la testa fissata in un adattatore per la testa.

Il cervello del topo esprime una proteina fluorescente che consente il rilevamento delle attività neurali.

Radere e sterilizzare in sequenza il cuoio capelluto prima di aprirlo.

Rimuovere il tessuto connettivo per esporre il cranio.

Segna le aree target e applica uno strato di colla.

Usa un microtrapano per assottigliare il cranio sull'area contrassegnata.

Rimuovere il pezzo di cranio per esporre il cervello.

Applicare liquido cerebrospinale artificiale per mantenere umido il cervello.

Installa una finestra ottica nell'area e sigillala con colla, che fornisce una base per il fissaggio del cemento.

Applicare del cemento dentale nero per bloccare la luce.

Ripeti la procedura sull'altro lato del cranio.

Lascia che l'animale si riprenda.

Per visualizzare l'attività neurale, posizionare il topo anestetizzato protetto sotto il microscopio e acquisire le immagini.

Confermare la mancanza di risposta al pizzicamento delle dita dei piedi su un topo Thy1-GCaMP6s anestetizzato di 20-25 grammi, da 1 e 1/2 a 2 e 1/2 mese e applicare un unguento sugli occhi dell'animale. Posiziona il mo

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