JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 3:45 min. • July 8th, 2025
Metti una fetta di midollo spinale di ratto in una camera di registrazione e fissala con un ancoraggio per tessuti.
Perfondere la fetta con liquido cerebrospinale artificiale.
Al microscopio, identificare la substantia gelatinosa traslucida o regione SG e selezionare un neurone SG sano.
Posizionare una pipetta per cerotti riempita con una soluzione ionica vicino al neurone.
Applicare una leggera pressione positiva per rimuovere eventuali detriti dal puntale della pipetta.
Spostare la pipetta verso il neurone.
Quindi, rilasciare la pressione positiva per formare una fossetta sulla membrana neuronale, creando un sigillo.
Modificare il potenziale di tenuta per avvicinarlo al potenziale di membrana a riposo, o RMP.
Utilizzare una breve aspirazione per rompere la membrana, stabilendo una configurazione a cellula intera.
Al RMP, applicare impulsi elettrici depolarizzanti.
Questi impulsi aprono canali del sodio voltaggio-dipendenti, consentendo un rapido afflusso di ioni sodio.
Questo afflusso di ioni innesca un potenziale d'azione, con conseguente attivazione dei neuroni.
Registra i modelli di attivazione dei neuroni.
Per condurre registrazioni di patch-clamp su cellule intere da neuroni
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