Registrazione del potenziale di campo locale da entrambi gli emisferi del cervello del topo

Inizia con un topo anestetizzato con la testa fissata in una cornice stereotassica.

Radere e sterilizzare il cuoio capelluto.

Fai un'incisione e rimuovi il tessuto residuo per esporre il cranio.

Pulisci il cranio con un disinfettante e pratica dei fori nei punti bersaglio.

Rimuovi lo strato esterno del cervello.

Inserire i microelettrodi riempiti con una soluzione ionica nei fori con l'angolazione desiderata.

Abbassare entrambi i microelettrodi nelle coordinate target del cervello.

Testare la resistenza degli elettrodi e regolare le impostazioni di registrazione per garantire l'acquisizione affidabile del potenziale di campo locale o dei dati LFP.

La LFP riflette le variazioni di tensione risultanti dall'attività collettiva di molti neuroni all'interno di una piccola regione.

Registra gli LFP da entrambi gli emisferi per confrontare l'attività neurale tra di loro.

Prima dell'intervento chirurgico, confermare la profondità dell'anestesia del topo eseguendo un pizzicamento della coda o delle dita dei piedi con una pinza. Quindi, posizionare il mouse in un apparato stereotassico e fissare la testa. Applicare un unguento su entrambi gli occhi per mantenerli umidi.

Quindi, radere la testa e sterilizzare l'area. Fai una piccola incisione da 12 a 15 millimetri al centro dell'area rasata. Usando una pinza, allontana delicatamente il cuoio capelluto dalla linea mediana. Successivamente, separare delicatamente la pelle e rimuovere il tessuto residuo.

Pulisci il cranio usando bastoncini di cotone rivestiti di perossido di idrogeno. Sotto uno stereomicroscopio, praticare due piccoli fori di raggio da 1 a 1,5 millimetri su entrambi i lati sinistro e destro del cranio per consentire l'inserimento dei microelettrodi di registrazione nelle regioni M2.

Con cautela, rimuovere la dura madre con un ago di tungsteno, quindi inserire due microelettrodi di registrazione separati riempiti con cloruro di sodio 0,5 molare nei fori con un angolo di 60 gradi utilizzando micromanipolatori meccanici.

Per la registrazione LFP, abbassare lentamente gli elettrodi di vetro sinistro e destro alle coordinate M2. Per il controllo di qualità, testare la resistenza di ciascun elettrodo utilizzando l'amplificatore differenziale. Quindi, imposta il processo di registrazione su 0,1 Hertz passa-alto e 1.000 Hertz passa-basso con amplificazione 1.000 volte. Raccogli i dati LFP grezzi digitalizzati in stato stabile per almeno 60 secondi, con il topo che respira uniformemente a due respiri al secondo in anestesia.