Analisi del comportamento del sonno nei topi attraverso registrazioni di elettroencefalogramma ed elettromiogramma

Fissare un topo anestetizzato su un telaio stereotassico.

Disinfetta la pelle rasata, copri il topo con un drappo e fai un'incisione sulla linea mediana per esporre il cranio.

Praticare due fori nel cranio in corrispondenza di specifiche coordinate stereotassiche.

Preparare un'unità di elettrodo di registrazione con un connettore a quattro pin collegato a fili di acciaio inossidabile.

Utilizzare due fili con viti come elettroencefalogramma o elettrodi EEG per misurare l'attività elettrica cerebrale.

Utilizzare gli altri due fili come elettromiogramma o elettrodi EMG per misurare l'attività elettrica muscolare.

Avvitare gli elettrodi EEG nei fori e fissare il gruppo elettrodo al cranio.

Inserire gli elettrodi EMG nei muscoli del collo.

Chiudere l'incisione con punti di sutura e lasciare che il topo si riprenda.

Trasferisci il mouse in una camera di registrazione insonorizzata.

Collegare il gruppo elettrodo a un cavo di registrazione e collegarlo a un amplificatore.

Registra i segnali EEG ed EMG per analizzare le diverse fasi del sonno e la veglia nei topi.

Prima di iniziare, sterilizzare tutti gli strumenti chirurgici in uno sterilizzatore a cordoni caldi. Una volta che il topo è confermato come anestetizzato da un pizzico di dita, radere i peli sulla testa e sul collo.

Quindi, fissa il mouse al telaio stereotassico e fissa la testa tra le due barre auricolari. Quindi, applicare un unguento oftalmico sugli occhi per prevenire la secchezza. Procedere con la detersione della pelle rasata con scrub a base di alcool e iodio.

Quindi, taglia lungo la linea mediana con un bisturi per esporre il cranio e fissa la pelle di lato usando delle clip per mantenere aperta l'area chirurgica. Utilizzando una fresa in metallo duro con un trapano da 0,8 millimetri, praticare due fori. Metti un foro sopra l'area corticale frontale. Metti il secondo foro sopra l'area parietale dell'emisfero destro.

Quindi, utilizzando un cacciavite da gioielliere, avvitare le viti di registrazione EEG in acciaio inossidabile nei fori. Inserire le viti con soli due o due giri e mezzo per ottenere il posizionamento epidurale sopra la corteccia. Le viti non devono oscillare una volta inserite. Questo è molto importante.

Ora, fissa il gruppo elettrodo con i perni verso l'alto al cranio. Gli elettrodi devono essere fissati in modo diretto. Usa un batuffolo di cotone per fissare la posizione degli elettrodi e incolla l'elettrodo usando cianoacrilato, seguito da cemento dentale.

Quindi, praticare piccoli fori nel trapezio e inserire l'elettrodo EMG in quei fori. Quindi, sutura la pelle con filo di seta di 0,1 millimetri di diametro. Ora rimuovi il mouse dalla cornice stereotassica e posizionalo su un pad termico.

Somministrare al topo iniezioni intraperitoneali di ampicillina e meloxicam e monitorare il topo fino a quando non riacquista la decubito sternale. Quindi, ospita il topo da solo.

Una settimana dopo l'impianto degli elettrodi, trasferire il topo in una gabbia sperimentale in una camera di registrazione insonorizzata. Fissare il gruppo elettrodo EEG/EMG del mouse a un cavo di registrazione collegato a un collettore rotante.

Collegare il cavo del convertitore AD a un amplificatore del filtro di segnale EEG/EMG collegato al collettore rotante. Utilizza un convertitore AD per convertire il segnale in un segnale digitale a 128 hertz e, infine, registra il segnale su un computer.

Abituare il mouse per due o tre giorni nella camera di registrazione. Avviare il software di registrazione EEG/EMG. Per iniziare, fai clic sulla scheda delle informazioni sul file di dati e fai clic sulla casella accanto al nome del file. Inserisci un nome per il file e fai clic su Salva. Quindi, dalla scheda delle condizioni di registrazione, selezionare tutti i canali EEG/EMG che devono essere registrati. Inoltre, selezionare la frequenza di campionamento in questa scheda.

Ora nella scheda delle informazioni sul canale, controlla se i canali selezionati vengono visualizzati correttamente. Una volta confermato, avvia la registrazione selezionando prima la scheda delle impostazioni del timer. Quindi, fare clic su Monitor per visualizzare EEG ed EMG. Se i segnali vengono visualizzati correttamente, impostare l'ora dell'orologio per l'inizio e la fine della registrazione nell'area principale del timer. Quindi, fai clic sul pulsante del monitor per avviare la registrazione.