Un metodo di array di micro-drive per la registrazione elettrofisiologica da più regioni cerebrali

Fissare un ratto anestetizzato in un telaio stereotassico. Radere e disinfettare il cuoio capelluto, quindi praticare un'incisione per esporre il cranio.

Praticare dei fori sopra il bulbo olfattivo per impiantare gli elettrodi di registrazione. Perforare sopra la corteccia frontale per impiantare elettrodi di riferimento che acquisiscono i segnali di attività cerebrale di base.

Inserire le viti di ancoraggio attorno all'ippocampo e creare un grande foro sopra la regione.

Posizionare un array di microazionamenti integrativo con la cannula contenente elettrodi di registrazione sopra il foro.

Utilizzare una soluzione di formatura del gel per fissare l'array. Applicare del cemento dentale che aderisca alle viti di ancoraggio e fornisca stabilità meccanica.

Collegare l'array agli elettrodi impiantati per la registrazione simultanea da più regioni del cervello. Isolare le connessioni per migliorare la qualità del segnale.

Lasciare che il ratto si riprenda, quindi far avanzare gli elettrodi dell'array per entrare in contatto con il cervello e lasciare che i segnali si stabilizzino.

Il ratto con gli elettrodi impiantati è pronto a registrare i segnali elettrici dal cervello.

Fissare il ratto a un dispositivo stereotassico, quindi radere e pulire il cranio e iniziare l'impianto dell'array con un'incisione di 3 centimetri lungo la linea mediana dal punto tra gli occhi al collo. Usando un trapano ad alta velocità, fai un paio di craniotomie circolari tra 0,7 e 1,0 millimetri di diametro sopra il bulbo olfattivo, che è 11,0 millimetri anteriormente e un millimetro bilaterale al bregma.

Quindi, impiantare i due elettrodi BR abbastanza in profondità da consentire alle punte delle viti di entrare in contatto con il cervello, che è profondo circa 2 millimetri. Utilizzare tra i sei e gli otto giri completi della vite.

Successivamente, fai un altro paio di craniotomie sopra la corteccia frontale, 2,7 millimetri anteriormente e 2,7 millimetri bilaterali al bregma. In questi fori, fissare i due elettrodi di riferimento di terra in modo che entrino in contatto con il cervello, a circa 1,6 millimetri di profondità. Questo richiede da quattro a cinque giri completi della vite.

Ora, pianifica una craniotomia circolare di grandi dimensioni con un diametro di circa 2,0 millimetri sopra l'ippocampo, 3,8 millimetri posteriormente e 2,5 millimetri bilateralmente al bregma. Quindi, fai da sei a otto fori da 1,0 millimetri nell'area che circonderà la craniotomia.

In ciascuno di questi fori, impiantare le viti di ancoraggio. Quindi, eseguire la craniotomia pianificata tra le viti. Sopra il foro grande, posizionare l'array di microdrive integrativo in modo che la punta della cannula si trovi appena sopra la craniotomia grande.

Riempi lo spazio tra la punta della cannula e la superficie del cervello con circa 100 microlitri di resina epossidica bicomponente. Nei prossimi cinque minuti, lasciare che la miscela si trasformi in un gel trasparente. Quindi, coprire la cannula, gli elettrodi BR, gli elettrodi di riferimento di terra e le viti di ancoraggio con cemento dentale.

Applicare circa cinque millimetri di cemento senza coprire le estremità aperte degli elettrodi di riferimento BR o di terra. Ora, salda tutte le estremità aperte degli elettrodi nel punto in cui si collegano alla scheda. Quindi, coprire la parte inferiore dell'array di microdrive integrativo e tutti i fili degli elettrodi con cemento dentale.

È importante coprire completamente i fili degli elettrodi in modo che il ratto non possa graffiarli dopo l'impianto. Ora lascia che il topo si riprenda. Dopo aver riacquistato conoscenza sufficiente per mantenere la decubito sternale, ospitalo da solo senza compagni di gabbia e dagli libero accesso a cibo e acqua.

Dopo l'intervento chirurgico, far avanzare gradualmente i tetrodi facendo avanzare le viti ogni giorno. Una volta che i tetrodi sono adiacenti alle aree cerebrali bersaglio, lasciali riposare per diversi giorni durante i quali i segnali si stabilizzeranno.